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Waters Symmetry色譜柱的清洗、再生和存放

更新時(shí)間:2024-10-22   點(diǎn)擊次數(shù):585次

Waters Symmetry色譜柱清洗與再生:

如果發(fā)生峰形改變、峰分叉、出現(xiàn)肩峰、保留時(shí)間改變、分離度變化或柱壓升高,說(shuō)明色譜柱可能已被污染。通常情況下,用純有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗(小心避免緩沖液出現(xiàn)沉淀)就足以去除污染物。如果沖洗不能解決問(wèn)題,可采用以下清洗和再生步驟灌注色譜柱。請(qǐng)根據(jù)樣品和/或您認(rèn)為污染色譜柱的物質(zhì)的性質(zhì),選擇與之匹配的常規(guī)清洗方法(見表1)。用20倍柱體積(例如對(duì)于4.6 × 250 mm色譜柱,使用80 mL溶劑)HPLC級(jí)溶劑沖洗色譜柱。將流動(dòng)相溫度升至35 °C~55 °C可以提高清潔效率。如果清洗和再生之后色譜柱性能仍然很差,請(qǐng)聯(lián)系我公司。

表1:色譜柱清洗溶劑使用順序和其他選項(xiàng)

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保護(hù)柱需要根據(jù)樣品污染情況定期更換。當(dāng)系統(tǒng)背壓穩(wěn)步上升至設(shè)定壓力限值時(shí),通常表明需要更換保護(hù)柱。突然出現(xiàn)分叉峰也表明需要更換保護(hù)柱。

Waters Symmetry色譜柱存放:

為了盡可能延長(zhǎng)色譜柱壽命和提高性能,使用色譜柱之后請(qǐng)用100乙腈保存保存色譜柱。請(qǐng)wu使用含緩沖液或鹽的水性流動(dòng)相保存色譜柱。如果流動(dòng)相洗脫液中含有酸/堿性添加劑、緩沖液或鹽,請(qǐng)先用至少10倍柱體積(常用色譜柱的柱體積見表2)HPLC級(jí)水沖洗色譜柱,再用至少15倍柱體積HPLC級(jí)100乙腈沖洗色譜柱,然后再儲(chǔ)存。如果不執(zhí)行這些步驟,可能導(dǎo)致緩沖鹽在色譜柱內(nèi)沉淀。使用隨附的端塞wan全密封色譜柱,防止溶劑蒸發(fā)導(dǎo)致柱床變干。

表2.空色譜柱體積(mL)(乘以10得到?jīng)_洗溶劑體積)

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注:如果色譜柱運(yùn)行了含甲酸鹽(如甲酸銨、甲酸等)的流動(dòng)相,并且之后使用100乙腈進(jìn)行沖洗,那么在重新安裝色譜柱并再次運(yùn)行含甲酸鹽的流動(dòng)相時(shí),柱平衡花費(fèi)的時(shí)間可能略長(zhǎng)。


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