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飛諾美Phenomenex Kinetex 核殼色譜柱使用注意事項

更新時間:2025-03-11   點擊次數(shù):92次
Kinetex 核-殼科技
使用包含納米結構技術的溶膠凝膠處理技術,在固態(tài)硅膠核上培養(yǎng)出均一穩(wěn)定的多孔外殼,形成核-殼顆粒。該顆粒形態(tài)會產生比全多孔顆粒更小的譜帶展寬,從而帶來較高的柱效。

色譜柱安裝

色譜柱標簽上的箭頭表明流動方向。在使用或反向沖洗Kinetex 1.3µm色譜柱時,切勿與箭頭方向相反。Phenomenex建議使用HPLC/UHPLC Sure-Lok™耐高壓PEEK陽性螺母接頭來安裝Kinetex柱至HPLC/UHPLC系統(tǒng)上。便捷的單件設計(AQ0-8503)能耐受至12000psi(827bar)的壓力。而三件式單元(AQ0-8504和AQ0-8505)包含一個PEEK螺母、套管和不銹鋼扣緊環(huán),能提供不漏連接,并且能耐受至19000psi(1310bar)的壓力。方便的螺母擰緊工具(AQ0-8530)可幫助實現(xiàn)不漏連接。
流動相限制
• Kinetex C18、XB-C18、 C8、和 Phenyl-Hexyl色譜柱于pH 1.5至10*穩(wěn)定且可用于典型的反相流動相(甲醇水、乙腈水或適當?shù)木彌_鹽水溶液/甲醇或緩沖鹽水溶液/乙腈的混合物)。
• Kinetex PFP色譜柱于pH 1.5至8.5穩(wěn)定,可用于典型的反相流動相(甲醇水、乙腈水或適當?shù)木彌_鹽水溶液/甲醇或緩沖鹽水溶液/乙腈的混合物)。 
• Kinetex HILIC色譜柱于pH 2至7.5穩(wěn)定,可用于典型的HILIC流動相(乙腈/緩沖鹽水溶液的混合物)。

* 僅適用于等度條件。

請只使用高純度的試劑和較高 品質的色譜級溶劑來制備流動相。痕量雜質可能會大幅度減少柱壽命。所有流動相在使用前都需經過濾和脫氣。請確保樣品和基質能wan全溶解于流動相,不相溶的溶劑或緩沖鹽沉淀可永jiu損害色譜柱。




請仔細閱讀這些注意事項:

請避免:
• 在低于每種Kinetex色譜柱的pH值下限下操作,因為這將會水解鍵合相
• 在高于每種Kinetex色譜柱的pH值上限下操作,因為這將會溶解硅膠
• 在使用或反向沖洗Kinetex 1.3um色譜柱時,與色譜柱標簽箭頭方向相反
• 不相溶的溶劑或緩沖鹽
• 突然的壓力變化
操作背壓
Kinetex 5μm與2.6µm色譜柱的zui高操作壓力是8700psi(600bar*)、Kinetex 1.7µm與1.3μm 色譜柱的zui 高操作壓力是15000psi(1000bar)。流動相流速設置應使色譜柱背壓不超過zui 高操作壓力。請注意、在zui高壓力下或接近zui 高壓力下操作會導致柱壽命縮短。
* 2.1mm ID色譜柱的背壓可穩(wěn)定至1000bar。
操作溫度
Kinetex色譜柱使用的zui高溫度達60°C。25°C以上可以降低流動相粘度和背壓、提高傳質率以及增強選擇性。當在高pH值(>8)下操作時,建議降低運行溫度以延長柱壽命。請注意,在zui高溫度下或接近zui高溫度下操作會導致柱壽命縮短。
色譜柱清洗和再生


如果您的柱壓持續(xù)升高,您可以使用以下建議的低流速反沖洗色譜柱(不適合用于任何Kinetex 1.3μm色譜柱或其他制造商的色譜柱):

柱子內徑
流速
2.1 mm
0.1 mL/min
3.0 mm
0.3 mL/min
4.6 mm
0.5 mL/min

反相 (C18、XB-C18、C8、Phenyl-Hexyl和PFP)

Kinetex反相色譜柱以10至20倍柱體積的下列溶劑沖洗
1)5:95乙腈/水(或甲醇/水),去除緩沖鹽
2)95:5乙腈/水(或甲醇/水)
3)THF(四氫呋喃)
4)95:5乙腈/水(或甲醇/水)
5)5:95乙腈/水(或甲醇/水)
6)流動相平衡

HILIC

Kinetex HILIC色譜柱以10至20倍柱體積的下列溶劑沖洗:
1)95%水/5%乙腈(去除緩沖鹽)
2)95%100mM醋酸銨,pH 5.8/5%乙腈
3)95%水/5%乙腈
4)流動相平衡
色譜柱保存
反相(C18、XB-C18、C8、Phenyl-Hexyl和PFP)
色譜柱幾天不用時,應保存在≥50%(v/v)乙腈/水或甲醇/水中。如果流動相含緩沖鹽,保存前請先用10至20倍柱體積的水/乙腈或水/甲醇沖洗色譜柱以去除緩沖鹽。沖洗色譜柱后請用柱塞頭旋緊色譜柱,以防保存溶劑揮發(fā)和柱床變干。

HILIC

色譜柱幾天不用時,應保存在90%(v/v)乙腈/水中。如果流動相含緩沖鹽,保存前請先用10至20倍柱體積的乙腈/水(90:10)沖洗色譜柱以去除緩沖鹽。沖洗色譜柱后請用柱塞頭旋緊色譜柱,以防保存溶劑揮發(fā)和柱床變干。
Kinetex 1.3µm色譜柱操作提示
使用Kinetex1.3μm色譜柱應避免并降低流動相儲液器以及UHPLC溶劑輸送泵中微生物的滋生。

以下是幾個常用技巧:

溶劑:使用超 純、較高 品質的UHPLC溶劑。
水性流動相:每天更換或加入5-10%的有機溶劑。
流動相儲液器:在重新注入流動相前,使用甲醇沖洗儲液器。
UHPLC系統(tǒng):每周使用異丙醇和甲醇沖洗。


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